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液相色譜柱影響因素及相關推薦

液相色譜柱,是一種用于液體色譜分析儀器。

影響因素
A:物理因素1.硅膠純度 ----· 填料硅膠的純度與殘留金屬離子濃度
2.色譜柱尺寸---填料床的長度和內徑
3.顆粒形狀------球型或不規則型
4. 粒徑------------平均顆粒直徑, 通常3-10µm
5.表面積---------顆粒外表面和內部孔表面的總和, 以m2/gram表示
6.孔徑------------顆粒的孔或腔的平均尺寸, 范圍80-300Å
B:化學性質
1.鍵合類型----- 單體鍵合 - 鍵合相分子與基體單點相連
2.碳覆蓋率------與基體物質相連的鍵合相的量
3.封端------------鍵合步驟之后, 用短鏈將裸露的硅羥基鍵合后封閉起來

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在選擇色譜柱之前,先多了解自己的樣品和雜質,他們的類型結構、極性、酸堿性、分子量大小等等,
1.樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測,即要選擇承受100%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱
2. 如果樣品極性太強,或酸性太強;可以選擇CN,NH2,或硅膠柱,HILIC(親水色譜),也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱(缺點是離子對試劑平衡時間長,對流動相pH要求比較精密,否 則很難重復實驗,另外離子對試劑很難洗下來,基本上用了離子對的色譜柱就不能再用于其它實驗)
3. 若樣品是堿性的;可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質,且硅膠端基封尾)或一些經過修飾的C18柱(如極性嵌入技術或堿去活技術等),他們都會減少堿性化合物的拖尾,一般會選擇中性或偏堿的條件下做,因為這樣可增加堿性樣品的保留
4.如果堿性化合物的極性太強,或堿性太強;可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測(優點是方法開發簡單,缺點是目前實 現這一技術的色譜柱品牌比較少,價格也高)或者選用HILIC色譜柱(硅膠柱在反相條件下使用,這也是很經典的檢測堿性樣品的方法)選擇強離子交換柱(缺點 是不能用來分析其它樣品,對流動相pH要求比較精密,否則很難重復實驗)也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱